卡氏肺孢子菌pVAX-p55-v3及pVAX-p55-v0真核表达载体的构建及表达鉴定

作者：冯燕梅; 罗永艾; 江涛; 韩晓黎; 彭丽; 吴玉蓉

来源：中国免疫学杂志, 2010, 26(03): 214-217.

• 卡氏肺孢子菌
• p55-v3及p55-v0
• 真核表达 Pneumocystis carinii
• p55-v3 and p55-v0
• Eukaryotic cell expression

目的:构建卡氏肺孢子菌p55-v3及p55-v0抗原基因真核表达载体,mRNA水平鉴定其在COS-7细胞中的表达。方法:以卡氏肺孢子菌总RNA为模板,RT-PCR技术扩增p55-v3及p55-v0抗原基因,连接至pTA2载体,再克隆到pVAX1真核表达载体,构建重组质粒pVAX-p55-v3和pVAX-p55-v0。重组质粒在感受态DH5α大肠杆菌中大量扩增后,转染至COS-7细胞,RT-PCR鉴定其在mRNA水平的表达。结果:构建的重组质粒经酶切及测序鉴定,与文献报道的同源性分别达到99.8%和99.9%;其编码的氨基酸与文献报道的同源性为100%。RT-PCR显示p55-v3和p55-v0...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院