重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达

作者：张迅轶; 尹喆; 沈智君; 冯云; 杨敏; 陈子昂; 纪亚忠^*

来源：检验医学与临床, 2019, 16(24): 3585-3587.

• 成纤维细胞生长因子10
• 间充质干细胞
• 转染

目的构建成纤维细胞生长因子10(FGF10)的载体pcDNA3.0-FGF10,观察FGF10在体内外的生物学作用。方法人早胚组织总RNA,扩增得到人FGF10cDNA片段并将其插入载体pcDNA3.0中,构建成pcDNA3.0-FGF10重组真核表达载体。将其转染入人胚源间充质干细胞(MSC),得到pcDNA3.0-FGF10-MSC。利用免疫荧光、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western-blot等方法鉴定转染效果。结果成功构建能持续稳定表达目的蛋白FGF10的重组质粒表达载体pcDNA3.0-FGF10-MSC。结论成功构建并转染质粒载体,为观察FGF10在体内外的生物学作用提供了实验工具。

• 单位
  同济医院; 同济大学