KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定

作者：陈伟; 方圆; 汪小五; 许常青; 朱晨辰; 杨宇; 张龙龙; 王林定

来源：安徽医科大学学报, 2016, 51(01): 1-4.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.01.001

• 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒
• K15基因
• 多克隆抗体

目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15Pex8)序列做为模板,构建K15Pex8的表达载体p QE-80L-K15Pex8。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15Pex8多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价。将p FJ和p FJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15Pex8多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别。结果由K15Pex8制备的抗K15Pex8多克隆抗体效价大于1∶6 400,能特异性识别重组质粒p FJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白。结论初步证明K15Pex8蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测。

• 单位
  安徽医科大学