鲜榨果汁基因组DNA快速提取方法的建立及优化

作者：王琳; 邢冉冉; 邓婷婷; 易秋菊; 王旭; 陈颖^*

来源：食品安全质量检测学报, 2023, 14(20): 17-25.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2023.20.004

• 鲜榨果汁
• 滤纸片法
• 基因组DNA
• 快速提取方法

目的 建立及优化鲜榨果汁基因组DNA快速提取方法。方法 本研究比较了植物DNA快速提取试剂盒法、棉签法、纤维素膜片法和滤纸片法4种方法提取15种鲜榨果汁基因组DNA的效果,并筛选不同的提取液和裂解液、优化裂解液中的盐酸胍浓度和果汁基因组提取时间。结果 滤纸片法采用DNA裂解液(6 mol/L盐酸胍、1%聚乙烯吡咯烷酮、50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、20 mmol/L乙二胺四乙酸、21.3 mmol/L曲拉通-X-100; pH 6.4)、DNA漂洗液3 (8 mol/L盐酸胍、50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐; pH 6.4)和DNA漂洗液4 (10 mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、100 mmol/L氯化钠; pH 8.0)即可在5 min内从鲜榨果汁中提取得到适用于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)的基因组DNA。结论 本研究建立的滤纸片法不需要离心机等昂贵的仪器设备、操作简单、无刺激性气味、无环境条件限制,具有快速、价廉、环保等优点,为果汁基因组DNA快速提取与现场鉴定研究提供了参考。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院; 天津科技大学