摘要

目的通过体外实验探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞移行的影响。方法实验研究。培养正常人PKCαRPE细胞,将实验分为Control组、Thymeleatoxin(PKCα激动剂)组、siRNA-PKCα(PKCα抑制剂)组和Nonsilencing siRNA(Non-siRNA)组,应用RT-PCR检测RPE细胞内PKCαmRNA的表达。细胞划痕实验观察RPE细胞的移行速度,Transwell实验观察RPE细胞的跨膜细胞数,活细胞动态实验观察RPE细胞的细胞活力。组间数据比较采用独立样本t检验。结果通过光镜和免疫荧光方法计数成功培养获得RPE细胞。Thymeleatoxin组的RPE细胞内PKCαmRNA的含量明显高于Control组(t=3.712,P=0.034),siRNA-PKCα组的PKCαmRNA的含量明显低于Non-siRNA组(t=3.274,P=0.031)。Thymeleatoxin组RPE细胞的移行速度、跨膜细胞数、细胞活力等均明显优于Control组(t=9.743、5.616、2.300,均P<0.05),siRNA-PKCα组的移行速度、跨膜细胞数、细胞活力等均明显弱于Non-siRNA组(t=3.643,P<0.001;t=7.202,P=0.002;t=2.418,P=0.042)。结论 PKCα对人RPE细胞的移行有上调作用,提示PKCα可为增生性玻璃体视网膜病变的防治提供新的药物靶点。

  • 单位
    温州医科大学附属第二医院