摘要
【目的】优化紫锥菊根中菊苣酸提取工艺,并测定菊苣酸在肠道细胞中的抗氧化效果。【方法】试验选用有机溶剂乙醇作为紫锥菊根粉末(80目)提取溶剂,对提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、提取次数以及原料与溶剂的比例等因素进行分析,得到每个因素下菊苣酸得率和该因素的对应曲线,再在单因素基础上,选择溶剂浓度(30%、40%、50%)、提取温度(60、70、80℃)、提取时间(1、2、3 h)和料液比(1∶12、1∶15、1∶18)4个因素3个水平设计正交试验。用不同浓度H2O2(100、200、400、600、800、1 000μmol/L)处理人结肠腺癌细胞(Caco-2)与猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)建立氧化应激模型。分别使用不同浓度菊苣酸(0、100、200、400、600、800、1 000μmol/L)处理氧化应激前后的细胞24 h,应用MTT法,分别测定菊苣酸对两种肠道细胞氧化应激的保护和缓解效果。【结果】菊苣酸最佳提取条件为:50%浓度的乙醇在70℃下采用1∶18的料液比,超声辅助提取2 h,得率为1.89 mg/g。细胞抗氧化试验结果显示,菊苣酸对Caco-2和IPEC-J2两种肠道细胞氧化应激均具有保护和缓解效果,对Caco-2细胞的保护作用和缓解作用的半数抑制浓度(IC50)值分别为172.6和207.5μmol/L,对IPEC-J2细胞的保护作用和缓解作用的IC50值分别为133.1和196.5μmol/L。【结论】试验得到了紫锥菊根粉中菊苣酸的最佳提取方案,为工业化高效提取菊苣酸提供了参考;同时菊苣酸对氧化应激的肠道细胞具有很好的保护作用,经计算其保护作用的IC50值较缓解效果更小,进一步证明了菊苣酸具有成为肠道抗氧化剂的潜力。
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