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摘要
目的：探讨荣筋拈痛方调控l n c R N AM G C-M i r g减轻骨关节炎（O A）软骨细胞内质网应激的作用与机制。方法：构建l n c R N AM G C-M i r g沉默软骨细胞；采用荧光原位杂交实验检测25μm o l/L毒胡萝卜素（T G）诱导的软骨细胞中l n c R N AM G C-M i r g的分布及表达；R e a l-t i m eP C R检测l n c R N A MGC-Mirg沉默后的软骨细胞中EDEM1、Caspase-3 mRNA水平变化；使用第一代软骨细胞进行后续实验，设置空白组、模型组、荣筋拈痛方组，其中空白组予以含10%胎牛血清的DMEM培养；模型组先以25μmol/L TG干预4 h，再予以含10%胎牛血清的DMEM继续培养；荣筋拈痛方组先以25μmol/L TG干预4 h，再更换含300μg/mL的荣筋拈痛方继续培养12 h。采用Real-time PCR检测TG诱导的软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg、EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153、Caspase-3基因相对表达水平；流式细胞术检测软骨细胞凋亡率。结果：lncRNA MGCMirg主要分布于软骨细胞的胞质中，与对照组比较，模型组软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg相对拷贝数明显增多。与TG+sh-NC组比较，TG+sh-Mirg组EDEM1、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.05）。与空白组比较，模型组软骨细胞中lncRNA MGC-Mirg、EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153、Caspase-3 mRNA相对表达水平显著增高（P<0.05）；与模型组比较，荣筋拈痛方组lncRNA MGC-Mirg、EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153、Caspase-3 mRNA相对表达水平显著降低（P<0.05）。模型组软骨细胞凋亡率高于空白组和荣筋拈痛方组。结论：荣筋拈痛方可通过调控lncRNA MGC-Mirg，减轻OA软骨细胞内质网应激反应，延缓软骨细胞退变。
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