肠黏膜屏障损伤在脱氧胆酸诱导肠腺瘤癌变过程中的作用研究

作者：董文逍; 曹海龙; 许梦雀; 王斯南; 王伟强; 鄢芳; 王邦茂

来源：中华肿瘤防治杂志, 2016, 23(14): 918-923.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2016.14.004

• 肠黏膜屏障损伤
• 脱氧胆酸
• 腺瘤癌变
• 紧密连接蛋白
• 杯状细胞
• 潘氏细胞

目的持续暴露脱氧胆酸(deoxycholic acid,DOC)可诱导肠腺瘤癌变,机制尚不清楚。本研究旨在探讨肠黏膜屏障损伤在DOC诱导肠腺瘤癌变过程中的作用。方法将20只4周龄Apcmin/+小鼠均分为对照组和DOC组,对照组常规饮水,DOC组给予含质量分数0.2%DOC饮用水,给药12周后处死,观察两组小鼠肠道腺瘤大小、数目及癌变率。采用HE染色评价肠道腺瘤病理类型,采用异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-conjuagted dextran,FITC-D)检测小鼠肠道通透性,采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学染色法评价两组小鼠肠道组织各种紧密连接蛋白、杯状细胞及潘氏细胞相关分子的表达水平。结果 DOC组Apcmin/+小鼠肠道息肉数量为57.00±3.07,较对照组21.50±4.69明显增加,t=20.03,P<0.000 1。DOC组小鼠血清中FITC-D浓度为(1.17±0.12)μg/mL,明显高于对照组(0.51±0.07)μg/mL,t=4.30,P=0.004;DOC组小鼠肠道ZO-1(0.31±0.04)和Claudin 3 mRNA表达量(0.14±0.02)明显低于对照组的0.78±0.07(t=5.53,P=0.000 3)和0.92±0.08(t=9.80,P=0.000 6),而DOC组增加肠道通透性的Claudin 7mRNA表达量为5.79±0.53,明显高于对照组的1.61±0.30,t=6.83,P=0.002 4;DOC组小鼠肠道染色阳性细胞数PAS(20.88±0.79)和MUC2(13.10±1.16)均较对照组35.44±1.68(t=7.84,P<0.000 1)及28.50±0.96(t=10.24,P<0.000 1)明显减少;且DOC组小鼠肠道MUC2mRNA表达量为0.15±0.04,低于对照组的0.91±0.05,t=11.34,P<0.000 1;DOC组胃型黏蛋白MUC5mRNA表达量为2.40±0.26,高于对照组的0.96±0.02,t=4.21,P=0.005 6;DOC组小鼠肠道潘氏细胞溶菌酶染色阳性细胞数为5.19±0.26,较对照组7.49±0.33显著下降,t=5.49,P=0.000 6。同时DOC组潘氏细胞分泌防御素(0.12±0.27)及隐凹素(0.20±0.35)基因表达量均低于对照组的0.87±0.05(t=13.75,P<0.000 1)和0.87±0.05(t=10.95,P<0.000 1)。结论 DOC可通过增加肠道黏膜通透性、破坏肠道上皮间紧密连接蛋白、减少杯状细胞及潘氏细胞数量损伤肠黏膜屏障,从而促进Apcmin/+小鼠腺瘤生长及癌变。

• 单位
  天津医科大学总医院