携带人NIS基因的重组腺病毒的构建

作者：黄蕤; 匡安仁; 余海放; 马超; 唐恭顺

来源：生物医学工程学杂志, 2005, (04): 765-768.

• 甲状腺钠/碘同向转运体
• 重组腺病毒
• 放射性碘

利用RT-PCR技术从Graves甲亢病人的甲状腺组织中扩增得到甲状腺钠/碘同向转运体(NIS)可编码区片段,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pAdTrack-CMV上,再与含有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183同源重组,经293细胞包装并扩增得到重组腺病毒AdNIS。结果显示重组腺病毒质粒经PmeI酶切鉴定,电泳中出现了诊断性片段;感染的293细胞出现了明显的细胞病变效应;PCR产物电泳证实了重组病毒的存在。病毒滴度为2.5～3×109efu/ml。表明成功构建了携带人NIS基因的重组腺病毒,这为基因转移NIS介导131I治疗非甲状腺肿瘤提供实验研究基础。

• 单位
  四川大学华西医院