体外培养耳蜗毛细胞氧化应激损伤的微小RNA调控网络分析

作者：王军义; 夏源; 杨翠婵; 王致

来源：中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2016, 51(10): 751-755.

• 氧化性应激
• 毛细胞,听觉
• 高通量核苷酸测序
• MicroRNA调控网络

目的通过体外培养耳蜗毛细胞氧化应激损伤的差异性微小RNA(microRNA,miRNA)构建的基因调控网络,分析耳蜗毛细胞氧化应激损伤的重要基因及功能,探讨以氧化损伤为基础的多种感音性聋的分子机制。方法以200μmol/L叔丁基双氧气水(tert butyl hydrogen peroxide,t-BHP)染毒培养的小鼠HEI-OC1细胞系构建氧化应激损伤耳蜗毛细胞模型,高通量sRNA测序筛选差异性miRNA,以6个差异性表达最显著的miRNA进行调控网络构建,分析miRNA调控网络互作关系里面的重要基因,并通过Gene Cards数据库对重要基因进行功能注释。结果高通量sRNA测序发现氧化应激损伤毛细胞出现24个差异性miRNA,其中mir-1934(1ogFC=2.367 947,P=2.35×10-7)、mir-411(logFC=2.093 687,P=3.13×10-6)、mir-717(logFC=1.927 67,P=3.24×10-5)、mir-503(1ogFC=-2.021 45,P=3.07×10-6)、mir-467e(logFC=-1.953 28,P=0.000 137)、mir-699o(logFC=-1.950 06,P=0.000 517)差异最显著;构建的miRNA调控网络中相连基因个数超过50节点的重要基因共有11个:Akt1、Src、Ctnnb1、Creb1、Ccnd1、Egfr、Gsk3b、Pten、Cdh1、Fras1、Ccnd2,其主要功能体现在参与多种细胞内信号传导通路调控细胞的凋亡和增殖。结论氧化应激损伤毛细胞有多种信号传导通路(PI3K-AKT/PKB通路、AKT/PKB通路、Wnt通路、ERK通路、Ras通路)参与调控细胞增殖和凋亡过程,这些信号通路互相交联形成网络调控,其中PI3K-AKT/PKB信号通路最为重要。

• 单位
  公共卫生学院; 广州市第十二人民医院; 广东药科大学