摘要
目的探讨慢病毒载体介导基质金属蛋白酶-3(MMP-3)RNAi对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响。方法将20只SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、空载体病毒组和MMP-3 RNAi组,每组5只。模型组、空载体病毒组和MMP-3 RNAi组建立心肌缺血-再灌注损伤模型,假手术组作为空白对照。采用微量注射器分4点在心肌中模型组注射0.9%氯化钠注射液20μL,空载体病毒组注射空白病毒载体20μL,MMP-3 RNAi病毒组注射MMP-3 RNAi慢病毒载体20μL,假手术组未做任何处理。实时荧光定量RT-PCR检测4组MMP-3 mRNA、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3 mRNA和Caspase-9 mRNA的表达水平,Western blot法检测MMP-3、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达水平,采用TUNEL染色检测4组的心肌细胞凋亡指数(AI)。结果MMP-3 mRNA、Caspase-3 mRNA、Caspase-9 mRNA相对表达水平和MMP-3、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平:模型组、空载体病毒组和MMP-3 RNAi组均低于假手术组,空载体病毒组、MMP-3 RNAi组均低于模型组,MMP-3 RNAi组低于空载体病毒组,差异有统计学意义(P<0.05)。空载体病毒组AI值低于假手术组和模型组,但差异无统计学意义(P>0.05)。MMP-3 RNAi组AI值低于假手术组、模型组、空载体病毒组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MMP-3可能通过调节Caspase-3、Caspase-9的表达参与了心肌缺血-再灌注损伤中细胞凋亡的过程。
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单位黄石市中心医院; 湖北理工学院