摘要
2020年,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)疫情全球爆发,疫情的持续给全球的经济和人类公共健康带来巨大的损失和危害,因此开发快速、准确的检测技术非常重要。基于聚合酶链式反应(PCR)的方法——逆转录实时荧光定量PCR反应(RT-qPCR)是使用最广泛的检测SARS-CoV-2RNA的方法。然而,RT-qPCR依赖于昂贵的仪器设备和训练有素的实验人员,且需数小时完成。与RT-qPCR检测相比,即时检测(POCT)具有简单、快速、经济、资源需求低等优点。该文综述了逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)和逆转录重组酶辅助等温扩增(RT-RAA)等基于非PCR的技术,这些都被认为是快速且简单的核酸检测方法;同时还讨论了CRISPR/Cas技术在POCT诊断方面的潜力,包括基于Cas13的SHERLOCK、基于Cas12a、Cas12b或Cas14的DETECTR、STOPCovid和HOLMOS技术。这些非常规的分子诊断方法可提高新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断的准确性和灵敏度,且可在更短的时间内提供结果,在大规模筛查及遏制SARS-CoV-2的传播方面发挥了重要作用,在临床分子诊断领域具有广阔的应用前景,为体外诊断行业未来快速诊断试剂盒的研发提供方向。
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单位东华大学; 生物工程学院; 菏泽学院