草酸青霉中一个膨胀因子基因POX06047的遗传分析

作者：庞妃; 陈超; 姚佳玥; 冯家勋; 段承杰^*

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(01): 172-181.

DOI：10.13417/j.gab.040.000172

• 草酸青霉
• 膨胀因子
• 缺失突变体
• 过量表达
• 纤维素酶活性

纤维素由于大量纤维素链间氢键的存在形成了很难被纤维素酶降解的微晶纤维素。膨胀因子通过破坏纤维素链间的氢键使纤维素酶能更好地接近和降解底物。草酸青霉(Penicillium oxalicum)HP7-1的基因组中注释为膨胀因子基因有4个,分别为POX01524、POX06047,POX07832和POX08485。其中POX06047被注释为类扩展蛋白(expansin-like)基因,通过结构域分析,POX06047含有一个类内切葡聚糖酶45家族结构域。本研究通过同源重组途径和冻融转化法在草酸青霉ΔPoxKu70菌株中将POX06047基因敲除,成功获得了缺失突变株ΔPOX06047。通过测定缺失突变株在液体产酶培养基下的各种纤维素酶产量和木聚糖酶产量,发现相比于出发菌株ΔPoxKu70,ΔPOX06047的CMCase产量和滤纸酶产量没有变化,而木聚糖酶产量、p-NPCase产量和p-NPGase产量均出现了不同程度的下降。将POX06047基因在草酸青霉ΔPoxKu70中进行过量表达,得到过量表达菌株OXPOX06047,检测结果表明,相比出发菌ΔPoxKu70,ΔPOX06047的p-NPCase、木聚糖酶产量有所提高,CMCase、p-NPGase产量有所下降,滤纸酶活力保持不变。

• 单位
  亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室