Native-PAGE染色法用于过氧化氢酶-3酶活性定量分析

作者：董晴; 韩晓云; 王颖; 何群

来源：中国科技论文, 2016, (12): 1398-1402+1430.

DOI：10.3969/j.issn.2095-2783.2016.12.016

• 生物化学
• 粗糙脉孢菌
• 过氧化氢酶-3
• Native-PAGE
• 染色法
• 过氧化氢酶-3酶活性 biochemistry
• Neurospora crassa
• catalase-3
• staining method
• catalase-3activities

通过定量比较过氧化氢酶-3(catalase-3,Cat-3)的酶活性与其蛋白量及mRNA的关系,确定Native-PAGE染色法能够直接反映出Cat-3蛋白含量,进而探究该方法用于定性和定量检测Cat-3活性的准确性。采用同源重组的方法进行cat-3基因敲除;通过大肠杆菌表达重组GST-Cat-3蛋白制备多克隆抗体;通过Western blotting检测、Northern杂交以及Native-PAGE染色法对粗糙脉孢菌Cat-3的酶活性进行定量分析。得到cat-3基因缺失突变体;获得特异性很高的Cat-3蛋白的多克隆抗体,并对H_2O_2胁迫处理和未处理的菌丝体中Cat-3表达量进行分析、...

• 单位
  黑龙江大学; 农业生物技术国家重点实验室; 中国农业大学; 生命科学学院