干扰乙酰辅酶A合成酶2对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖及凋亡的影响

作者：傅聪; 周月鹏; 尹超云; 凌锐; 浦希; 汤翔; 陈德玉^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2021, 31(05): 374-379.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y200248

• 三阴性乳腺癌
• 乙酰辅酶A合成酶2
• RNA干扰
• 增殖
• 凋亡

目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthase 2,ACSS2)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:选用正常乳腺上皮MCF-10A细胞与三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和蛋白质印迹法分别检测及比较两者ACSS2 mRNA和蛋白表达差异;设计并合成针对ACSS2的特异性干扰RNA(siRNA-ACSS2)及无序序列的阴性对照(siRNA-NC),分别瞬时转染MDA-MB-468细胞并采用qRT-PCR和蛋白质印迹法鉴定其干扰效果;采用CCK-8法检测转染后MDA-MB-468细胞增殖能力;流式细胞术检测MDA-MB-468细胞转染后细胞凋亡水平;蛋白质印迹法检测MDA-MB-468细胞中PI3K/AKT信号通路以及凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、Bcl-2、Bax和增殖相关蛋白Ki-67等表达。结果:MDA-MB-468细胞中ACSS2 mRNA和蛋白表达水平明显高于MCF-10A细胞(P<0.01);与阴性对照组细胞相比,靶向干扰MDA-MB-468细胞ACSS2表达后细胞增殖活力明显下降(P<0.01),细胞凋亡水平明显上升(P<0.01),p-PI3K、p-AKT、Ki-67和Bcl-2表达明显降低(P均<0.01),cleaved-caspase-3、Bax表达明显上升(P均<0.01)。结论:干扰ACSS2表达可能通过PI3K/AKT信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖和促进凋亡发生。

• 单位
  江苏大学附属医院