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摘要
目的 肝纤维化是慢性肝病发展的共同病理特征，但目前国内外尚缺乏理想的抗肝纤维化药物。文章旨探索汉黄芩苷在肝纤维化和肝星状细胞活化中的作用机制。方法 用四氯化碳(CCl_4)诱导C57BL/6雄性小鼠肝纤维化模型，将小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组和汉黄芩苷组(10、20和40 mg/kg)。除正常组外，其余4组均腹腔注射CCl_4建立肝纤维化模型，第4周开始给予汉黄芩苷灌胃。各组小鼠于造模第8周末处死。HE染色观察肝组织病理形态；生化法检测小鼠血清中血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和肝丙二醛(MDA)含量；免疫组化和Western blot检测肝组织中α-SMA、COL1α_1和fibronectin表达情况。体外实验分组为正常组、PDGF-BB组、汉黄芩苷组(40、60和80μmol/L)。采用PDGF-BB诱导HSC-T6细胞活化，并加入不同浓度汉黄芩苷，MTT检测HSC-T6细胞活力；免疫荧光和qRT-PCR检测α-SMA和COL1α_1蛋白表达；Western blot检测SOCS1和细胞周期相关蛋白。结果 HE染色显示，模型组小鼠肝小叶排列紊乱，大量炎性细胞浸润，空泡增多；而汉黄芩苷高剂量组(40 mg/kg)中肝小叶排列较规则，炎性细胞以及空泡明显减少。免疫组化和Western blot结果结果均显示，模型组α-SMA、COL1α_1和fibronectin在肝纤维化瘢痕周围大量表达，在汉黄芩苷组(40 mg/kg)中表达显著降低(P<0.05)。与正常组相比，模型组小鼠肝组织中SOCS1基因和蛋白水平表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比，汉黄芩苷给药组可显著升高SOCS1基因以及蛋白水平表达(P<0.05)。qRT-PCR以及Western blot结果显示siRNA 2和siRNA 3均能明显下调SOCS1的基因和蛋白表达(P<0.05),其中siRNA 2的靶向效率达到0.286。与PDGF-BBα-SMA(1.0±0.1)、COL1α_1(1.0±0.1)和fibronectin基因组(1.1±0.3)相比，汉黄芩苷组(1.1±0.1、1.3±0.1、1.1±0.3)有明显抑制作用(P<0.05)。而加入SOCS1 siRNA 2后，α-SMA、COL1α_1和fibronectin基因水平(2.0±0.1、2.0±0.2、2.1±0.2)升高(P<0.05)。结论 汉黄芩苷通过调控SOCS1水平，抑制HSC-T6细胞增殖，从而有效缓解肝损伤和肝纤维化。
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