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摘要
本文研究了黄杆菌褐藻胶裂解酶基因（rFlAlyA）在枯草芽孢杆菌中的高效表达，高密度发酵48 h最高酶活为2550 U/mL，蛋白含量达4.5 mg/mL。经（NH4）2SO4沉淀和SP强阳离子交换柱纯化后得到电泳级纯酶，分子量约为30 kDa。rFlAlyA最适pH为7.5，在pH 4.0-11.0范围内可保持80%以上酶活；最适温度为50 oC，在50 oC及以下可保持80%以上酶活。底物特异性分析表明，rFlAlyA特异性降解聚甘露糖醛酸片段，最短链底物为甘露糖醛酸三糖。rFlAlyA在最适条件下酶解褐藻酸钠4 h后还原糖浓度达33 mg/mL，底物转化率为70.1%，ESI-MS分析酶解产物的聚合度（DP）为1-8，离子色谱分析显示DP=3相对含量最高，为34.0%。结果表明，经枯草芽孢杆菌高效表达的褐藻胶裂解酶rFlAlyA可用于制备褐藻寡糖。
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