HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法的建立及优化

作者：薛正翔^*; 谢玉玲; 戴振贤; 张剑清; 吴玉水

来源：生物化工, 2023, 9(01): 7-11.

• HIV
• HIV-1/2抗体
• P24抗原
• 化学发光免疫分析

目的：建立并优化HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法（CLIA）。方法：采用化学发光免疫的方法，通过对包被条件、HIV酶用量、反应加入量、反应时间和温度等反应参数进行优化，建立HIV抗原抗体联合检测方法，使用HIV国家参考品评价所建立方法的准确性。结果：包被比例取HIV-1抗原1∶5 000、HIV-2抗原1∶1 0000、HIV P24单抗1∶2 000；检测酶比例取Biotin-P24多抗1∶2 000;HRP-HIV-1抗原1∶5 000、HRP-HIV-2抗原1∶20 000、SA-HRP 1∶4 000；待测样本75μL/孔；第一步反应温度和时间分别为37℃和60 min，第二步反应温度和时间分别为37℃和30 min，为检测方法的较佳反应条件。检测国家参考品结果表明，阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、灵敏度和精密性均符合国家参考品标准要求。结论：成功建立了特异、灵敏的HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法，为在临床上推广应用提供了科学依据。

• 单位
  福建省洪诚生物药业有限公司; 湄洲湾职业技术学院