内质网氨基肽酶1与子痫前期遗传易感性研究

作者：管程程; 侯勃; 张铷; 王敬丽; 徐龙强; 刘世国^*

来源：中华围产医学杂志, 2023, 26(03).

• 子痫前期
• 疾病遗传易感性
• 氨肽酶类
• 次要组织相容性抗原
• 多态性, 单核苷酸

目的探究内质网氨基肽酶1(endoplasmic reticulum aminopeptidase 1, ERAP1)是否为子痫前期发病的遗传易感基因, 以及ERAP1参与子痫前期发病的分子机制。方法回顾性选择2018年9月至2021年4月在青岛大学附属医院、枣庄市妇幼保健院等6家山东省地级市三甲医院的990例子痫前期患者(病例组)和1 240例健康孕妇(对照组)。收集所有孕妇的外周血样本, 提取DNA, 通过Taqman探针聚合酶链反应技术进行rs30187、rs27044及rs469783位点的基因分型;并在构建ERAP1野生型质粒的基础上使用点突变法构建2种错义变异质粒:rs30187(c.1583A>G)、rs27044(c.2188C>G), 将不同的转染分子转染至Htr8细胞中, 检测ERAP1的表达水平, 并通过Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和细胞增殖实验检测不同转染对细胞功能的影响, 根据转染分子的不同, 分为以下6组:敲低对照组、敲低组、过表达对照组、过表达组、变异1组及变异2组。采用两独立样本t检验、秩和检验和χ2检验进行统计学分析。结果 (1)rs30187位点的遗传学分布(基因型:χ2=29.25;等位基因:χ2=4.68)、rs27044位点的基因型分布(χ2=28.95)、rs469783位点的遗传学分布(基因型:χ2=7.01, 等位基因:χ2=6.45)在病例组和对照组间差异有统计学意义(P值均<0.05)。病例组中rs30187和rs27044位点均是隐性基因CC的频率更高(χ2值分别为20.82和19.97, P值均<0.05), 而rs469783位点的显性基因中CC基因型的频率更低(χ2=5.82, P=0.016)。(2)细胞转染后, 与敲低对照组相比, 敲低组ERAP1的表达水平明显下降(mRNA:0.5±0.1与1.0±0.0, t=7.49;蛋白:0.4±0.1与0.7±0.1, t=2.81;P值均<0.05);划痕48 h后, 敲低组细胞迁移率明显下降[(16.5%±1.8%)与(23.8%±2.4%), t=3.33, P=0.031];细胞培养24 h后, 敲低组Transwell细胞数量明显下降(423.7±21.3与499.0±24.6, t=3.29, P=0.031)。转染变异1组和变异2组后, 与过表达组相比, ERAP1的mRNA和蛋白表达也均明显下降, Transwell小室细胞穿过的数量明显下降, 划痕48 h后细胞迁移率均表现出下降趋势[变异1组:P=0.004, 变异2组:(21.1±4.6)%与(28.3±1.1)%, t=2.10, P=0.099]。转染过表达组至细胞后, 与过表达对照组相比, ERAP1的mRNA和蛋白表达明显上升, 细胞的增殖能力增强, 细胞划痕48 h后迁移率升高, 24 h穿过Transwell小室的细胞数量增多, 细胞侵袭能力增强(P值均<0.05)。结论 ERAP1基因rs30187、rs27044和rs46978与子痫前期易感性相关, rs30187和rs27044位点上子痫前期患者CC基因型携带者更多, 而rs469783位点上健康孕妇CC基因型的携带者更多。ERAP1可能通过影响滋养层细胞的迁移侵袭能力参与子痫前期的发病。

• 单位
  青岛大学附属医院