二甲基甲酰胺通过活性氧介导线粒体通路诱导H9c2心肌细胞凋亡研究

作者:马晓丽; 杨永坚; 王娟; 荣青秀; 王璐璐; 孙文静; 向梅
来源:中华疾病控制杂志, 2017, 21(04): 404-408.
DOI:10.16462/j.cnki.zhjbkz.2017.04.020

摘要

目的初步探讨二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)是否通过线粒体通路致H9c2心肌细胞凋亡及可能机制。方法 H9c2心肌细胞体外培养,分组给予不同处理:正常对照组,N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)(4 mmol/L)组,DMF(200 mmol/L)组,NAC(4 mmol/L)+DMF(200 mmol/L)组,24 h后使用免疫荧光细胞化学法(immune-fluorescence cytochemistry,IFC)检测细胞内细胞色素C(cytochrome C,Cyt-c)定位,蛋白免疫印迹法检测胞浆Cyt-c、Bcl-2、Cleaved caspse-3水平。结果 IFC观察发现,正常对照及NAC组Cyt-c呈点状或斑块状分布于胞浆,DMF作用24 h导致Cyt-c弥散分布于胞浆,而NAC可抑制DMF的这种作用;蛋白免疫印迹结果表明,Cyt-c蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=26.14,P<0.001),与对照组相比,DMF组Cyt-c水平升高,NAC+DMF组较DMF组Cyt-c水平降低,差异均有统计学意义(均有P<0.001);Bcl-2蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=28.92,P<0.001),与对照组相比,DMF组Bcl-2蛋白水平降低,与DMF组相比,NAC+DMF组Bcl-2蛋白水平升高,差异均有统计学意义(均有P<0.001);Cleaved caspase-3蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=28.98,P<0.001)),与对照组相比,DMF组Cleaved caspase-3水平上升,NAC+DMF组较DMF组Cleaved caspase-3水平降低,差异均具有统计学意义(均有P<0.001)。结论 DMF可以通过线粒体通路诱导H9c2心肌细胞凋亡,氧化应激可能参与该通路的发生。

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