食源性单增李斯特菌inlA/inlB/inlC基因缺失株的构建及其生物学特性分析

作者：任静静; 杨铭伟; 陈云飞; 尹华; 王欣雨; 李蓓蓓; 蒋建军^*; 王鹏雁^*

来源：中国畜牧兽医, 2019, 46(01): 45-53.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.01.006

• 单增李斯特菌
• 内化素基因
• 基因突变株
• 生物学特性

为探究内化素inlA/inlB/inlC基因对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)生物学特性的影响,本研究采用融合PCR方法构建Lm681 inlC基因缺失突变体,并构建pKSV7-△inlC穿梭载体,将其转化Lm681-△inlAB感受态细胞,利用温度(42℃)和氯霉素(10μg/mL)抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组子进行鉴定并研究其部分生物学特性。结果显示,PCR和测序结果证实成功构建了3基因缺失株(Lm681-△inlABC),且缺失株的生长特性与野生株相比无明显差异,溶血特性与野生株保持一致;小鼠感染试验显示,野生株Lm681、Lm681-△inlAB和Lm681-△inlABC对小鼠的致死率分别为80%(8/10)、60%(6/10)和40%(4/10),对小鼠的LD50分别为4.36×104、1.35×106和2.95×107 CFU,且Lm681-△inlABC在肝脏、脾脏及脑组织中的定植能力极显著低于野生株(P<0.01)。研究结果表明,inlA/inlB/inlC基因对Lm致病性发挥具有一定的作用,为深入研究inlX基因介导Lm入侵宿主细胞过程中的作用机制提供了科学依据。

• 单位
  动物科技学院; 石河子大学