摘要
目的:探讨人吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)对胃癌细胞AGS增殖和侵袭的影响。方法:人胃癌细胞AGS转染敲减和过表达PYCR1的质粒,设置3种敲减序列,qRT-PCR和Western Blot检测PYCR1 mRNA和蛋白表达以验证敲减效率,并以敲减效率最好的进行后续实验,AGS细胞分为si-NC组、si-PYCR1组、pcDNA组、PYCR1组,采用CCK8检测各组不同时间点细胞活力,采用伤口愈合实验检测各组迁移能力,采用Transwell实验检测各组迁移和侵袭能力。结果:qRT-PCR和Western Blot检测结果发现,三种敲减序列PYCR1 mRNA和PYCR1蛋白均低于si-NC组,过表达PYCR1组PYCR1 mRNA和PYCR1蛋白高于pcDNA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CCK8检测各组细胞增殖活力,结果发现,si-PYCR1组48 h、72 h和96 h细胞活力显著低于si-NC组相同时间点,而PYCR1组48 h、72 h和96 h细胞活力高于pcDNA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。伤口愈合实验检测各组细胞迁移能力,以48 h/0 h划痕宽度进行定量分析,结果发现,si-PYCR1组48 h/0 h划痕宽度高于si-NC组,PYCR1组48 h/0 h划痕宽度低于pcDNA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力,以迁移和侵袭细胞数进行定量分析,结果发现,si-PYCR1组迁移和侵袭细胞数少于si-NC组,PYCR1组迁移和侵袭细胞数多于pc DNA组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论:PYCR1可以促进胃癌细胞增殖、迁移及侵袭,可能是胃癌发病机制的关键分子和治疗的新靶点。
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单位福州市第一医院