CpG ODN对Treg细胞及Th17细胞分化的影响

作者：李洁琼; 纪玉强; 杨威; 姚英民; **光; 郭成

来源：华中科技大学学报(医学版), 2015, 44(04): 383-400.

• CpG ODN
• 免疫调节
• Treg细胞
• Th17细胞

目的研究免疫佐剂CpG ODN对小鼠脾细胞中Treg细胞、Th17细胞分化的影响,为进一步的临床免疫治疗应用奠定基础。方法体外分离小鼠脾细胞后,加入抗CD3单抗及抗CD28单抗培养,并相应加入诱导Treg细胞分化的细胞因子TGF-β、IL-2或诱导Th17细胞分化的细胞因子TGF-β、IL-6、IL-23,培养24h后加入CpG1982、CpG1826继续培养48h,培养结束后收集细胞进行细胞内染色流式细胞术检测Treg/Th17细胞,利用实时定量PCR检测Foxp3、RORγt、IL-10、IL-17mRNA的水平,Western blot检测Foxp3、RORγt蛋白表达,ELISA检测脾细胞培养上清IL-10、IL-17水平。结果在细胞因子TGF-β、IL-2的诱导下,CD4+Foxp3+Treg细胞数量明显增多,核转录因子Foxp3 mRNA和蛋白水平均增高,且细胞培养上清中IL-10的水平也升高,在细胞因子诱导的同时加入CpG1826培养后CD4+Foxp3+Treg细胞数量明显减少,Foxp3水平降低,培养上清中IL-10的水平降低,差异具有统计学意义(均P<0.05);单独加入CpG1826以及在培养液中加入细胞因子TGF-β、IL-6、IL-23后,Th17细胞数量均明显增加,核转录因子RORγt水平升高,细胞培养上清中IL-17水平增加,与对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05),CpG1826联合细胞因子组则对Th17细胞分化具有更加明显的刺激效应(P<0.05)。结论免疫佐剂CpG1826具有抑制小鼠脾细胞中Treg细胞分化、促进Th17细胞分化的作用,从而发挥对Treg/Th17系统的调节功能。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院; 西安市第一医院