摘要

为探讨放射性外泌体介导的辐射旁效应对心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)的影响并观察黄芪甲苷(astragaloside IV,AST)的防护效应,该研究以2 Gy X线辐照大鼠CFs,48 h后超速离心提取放射性外泌体(X-exo),进行外泌体形态、浓度和表面标志蛋白鉴定。将CFs分为对照组(Control)、照射组(X-CFs)、CFs与放射性外泌体共培养组(X-exo+CFs)和黄芪甲苷干预组(X-exo+AST-CFs),采用流式细胞术检测各组细胞周期;划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测纤维化相关分子TGF-β1、Col-I的表达情况。结果显示,X-CFs组和X-exo+CFs组在干预后24 h、48 h处于G0/G1期的细胞比例均低于Control组(P<0.01),S期和G2/M期的细胞比例均高于Control组(P<0.01);X-CFs和X-exo+CFs组细胞迁移率在12 h、24 h、48 h时均显著高于Control组(P<0.05);在48 h时X-CFs组和X-exo+CFs组TGF-β1、Col-I蛋白表达量均高于Control组(P<0.01)。X-exo+AST-CFs组在干预后24 h、48 h时处于G0/G1期的细胞比例高于X-exo+CFs组(P<0.01),处于S期、G2/M期的细胞比例均低于X-exo+CFs组(P<0.01);对比X-exo+CFs组,X-exo+AST-CFs组干预后,12 h、24 h、48 h细胞迁移率分别降低了62.6%、40.6%、41.2%(P<0.01),48 h时TGF-β1、Col-I蛋白表达量分别降低了15%、21.9%(P<0.01)。这说明X线诱导的外泌体(放射性外泌体)能促进共培养的CFs增殖、迁移、TGF-β1和Col-I高表达,且AST对这种放射性外泌体通过辐射旁效应引起的促纤维化有一定的抑制效应。