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摘要
目的：基于特异性聚合酶链式反应（PCR）建立了一种中亚苦蒿药材的鉴别方法，可以准确、便捷地鉴别中亚苦蒿及其近缘种。方法：利用Chloroplast Genome Information Resource(CGIR)数据库查找中亚苦蒿及其近源种叶绿体基因组序列，并筛选获得中亚苦蒿特异性单核苷酸多态性（SNP）位点，根据SNP位点设计一对中亚苦蒿特异性鉴别引物zykh1-F和zykh1-R。采集中亚苦蒿及其常见近缘种的原植物样本，建立中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法并优化反应体系，对该方法进行耐受性和适用性考察。利用该方法对从新疆药材市场购买中亚苦蒿药材样本进行鉴别。结果：中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法采用鉴别引物zykh1-F和zykh1-R，退火温度为54℃、循环次数为33次。经PCR扩增和凝胶电泳后中亚苦蒿在210 bp处可观察到单一明亮条带，其余近缘种如艾、黄花蒿、白叶蒿、野艾蒿均无条带。结论：该研究所建立的中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法可准确鉴别中亚苦蒿及其常见近缘种，具有高度特异性，且该方法节约时间和成本，为中亚苦蒿资源引种和利用提供一种方便快捷的物种鉴别方法。
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单位道地药材国家重点实验室; 安徽中医药大学; 中国中医科学院
