表达H5N1亚型禽流感HA、NA、M1基因的重组杆状病毒的鉴定

作者：李晶梅; 陈鲁杰; 王焕君; 李改; 朱薇; 张飞雁; 石宝兰; 漆世华; 谢红玲^*

来源：中国兽药杂志, 2021, 55(12): 9-13.

• 重组杆状病毒
• 禽流感病毒样颗粒
• 电镜
• Western Blot
• ELISA

为证实插入了禽流感HA、NA和M1基因的重组杆状病毒(VLP01株)能表达HA、NA和M1蛋白并自行组装成具有禽流感形态的病毒样颗粒，对VLP01株的细胞培养上清进行离心纯化或透析处理，获得的表达产物用电镜、Western Blot、ELISA进行鉴定。电镜观察表达产物，可见禽流感病毒样颗粒；以Western Blot方法用HA、NA和M1抗体分别检测表达产物，可见特异性条带；以NA多抗为捕获抗体、HA单抗为检测抗体建立双抗体夹心ELISA方法检测表达产物，结果为阳性，说明表达产物为同时含有HA蛋白和NA蛋白的病毒样颗粒。结果显示，VLP01株能够表达HA、NA和M1蛋白，并自行组装成禽流感病毒样颗粒分泌到细胞培养上清中。