摘要
探索体内给予TGF-β质粒是否有利于诱导过敏小鼠肠道TGF-β表达;同时,分别采用质粒常规肌肉给药和壳聚糖纳米口服给药途径,比较OVA过敏小鼠肠道过敏炎症的缓解状况,了解TGF-β质粒经壳聚糖微粒口服给药是否优于常规肌肉给药,更利于食物过敏治疗。构建pBudCE4.1/TGF-β1真核表达重组质粒并制备壳聚糖-DNA纳米颗粒。建立BALB/c小鼠OVA肠道过敏模型,并随机将其分为口服壳聚糖/pBudCE4.1/TGF-β1质粒(Chit)组、口服pBudCE4.1/TGF-β1裸质粒对照(Nak)组、肌肉注射pBudCE4.1/TGF-β1裸质粒对照(Nak-im)组、口服pBudCE4.1/TGF-β1空质粒对照(Pla)组、激发(Cha)组、生理盐水对照(Ns)组。以实时荧光定量RT-PCR测定小肠组织中TGF-β1、IFN-γ、IL-4 mRNA表达,ELISA法测定小鼠小肠黏液中总IgA、OVA特异性IgA、外周血清OVA特异性IgE含量,组织荧光法测定小肠剩余组织胺含量。六组小鼠中,Ns组小鼠小肠组织TGF-β1和IFN-γmRNA表达、小肠剩余组织胺、小肠黏液中总IgA、OVA特异性IgA含量最高(P<0.01),小肠组织IL-4 mRNA、外周血清OVA特异性IgE含量最低(P<0.01);Nak-im、Chi组小鼠小肠组织TGF-β1和IFN-γmRNA表达、小肠剩余组织胺、小肠黏液中总IgA、OVA特异性IgA含量较Cha、Nak、Pla三组升高(P<0.01),且Chi组较Nak-im组高(P<0.01);Nak-im、Chi组小鼠小肠组织IL-4 mRNA表达、外周血OVA特异性IgE含量较Cha、Nak、Pla三组降低(P<0.01),且Chi组较Nak-im组低(P<0.01)。pBudCE4.1/TGF-β1质粒经常规肌肉或壳聚糖纳米微粒口服形式给药,均可促进过敏小鼠肠道TGF-β1表达,缓解肠道炎症,且以壳聚糖口服给药途径优于肌肉给药途径。进行壳聚糖为载体的基因转运研究可望提高TGF-β1治疗食物过敏的效果。
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单位上海交通大学医学院附属新华医院