miR-16-5p通过靶向SPARC促进人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的研究

作者：闫柄文; 张仔昂; 薛萍^*

来源：空军军医大学学报, 2023, 44(07): 655-660.

DOI：10.13276/j.issn.2097-1656.2023.07.014

• 人瘢痕疙瘩成纤维细胞
• 凋亡
• 微小RNA
• 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白

目的 探究miR-16-5p对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)凋亡的作用及机制。方法 利用实时PCR技术检测人正常皮肤成纤维细胞(NFB)和KFB中miR-16-5p水平；利用细胞转染分别将miR-16-5p的对照序列(对照组)、miR-16-5p的模拟物序列(模拟物组)、miR-16-5p的互补序列(抑制物组)转染入KFB后，利用荧光显像技术和实时PCR技术检测转染效果；利用流式细胞仪和形态学手段评估各组KFB凋亡情况；利用Western blotting技术检测各组KFB凋亡相关蛋白含量；利用荧光素酶报告基因技术和Western blotting技术验证miR-16-5p的下游靶基因。结果 与NFB相比，KFB中miR-16-5p低表达；与对照组相比，模拟物组KFB内miR-16-5p含量增加(P<0.05),抑制物组KFB内miR-16-5p含量降低(P<0.01);与对照组相比，模拟物组KFB凋亡增加，抑制物组KFB凋亡减少(均P<0.05);与对照组相比，模拟物组KFB中Caspase-3和Bax表达增加，而Bcl-2表达减少；抑制物组KFB中Caspase-3和Bax表达减少，而Bcl-2表达增加(均P<0.05);与对照组相比，模拟物组抑制富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因(SPARC)3′UTR质粒的荧光素酶活性(P<0.05);与对照组相比，模拟物组KFB中SPARC蛋白低表达，而抑制物组KFB中SPARC蛋白高表达(P<0.05)。结论 miR-16-5p在KFB中低表达，miR-16-5p可通过靶向SPARC促进KFB的凋亡。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 西京医院