摘要
目的探讨二十二碳五烯酸(DPA)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向软骨细胞分化的影响。方法通过Binding DB寻找DPA潜在的作用靶点, 利用京都基因及基因组百科全书(KEGG)和Gene ontology(GO)富集DPA靶点调控通路及生物学过程。在hBMSCs诱导成软骨分化中添加DPA, 培养15 d进行实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测(n=3), 比较DPA组与CON组软骨分化关键基因性别决定区Y框蛋白9(SOX9)和聚蛋白聚糖(ACAN) mRNA的表达量。培养21 d后用鬼笔环肽染色和免疫荧光染色检测细胞骨架和ACAN蛋白分布(n=10), 采用独立样本t检验分析组间差异。结果 DPA具有16个潜在作用靶点, 这些靶点可能参与过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路和脂质代谢相关生物学过程。分化中的软骨细胞, SOX9和ACAN的mRNA表达DPA组均高于CON组(1.965±0.118比1.002±0.041, q=9.974, P<0.01)和(1.216±0.018比1.000±0.018, q=3.057, P<0.05)。细胞骨架重建DPA组低于CON组(9.682±0.762比21.450±1.653, t=6.466, P<0.01);而ACAN蛋白积累DPA组高于CON组(12.510±1.215比9.539±0.746, t=2.087, P<0.05)。结论 DPA促进hBMSCs成软骨细胞分化。
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单位河北医科大学第三医院; 青岛大学; 青岛大学附属医院; 基础医学院