多拉菌素通过线粒体信号通路诱导食管癌细胞凋亡

作者：李新; 王晓兴; 王丽薇; 陈志豪; 王晴; 高爱丽^*

来源：中国医院药学杂志, 2021, 41(14): 1410-1416.

DOI：10.13286/j.1001-5213.2021.14.07

• 食管癌
• 多拉菌素
• 凋亡
• 细胞周期

目的:探讨多拉菌素(doramectin,DRM)在体内、体外对食管癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:DRM处理Eca109和EC9706细胞,检测细胞在24,48,72 h存活率;药物处理48 h后,观察两种细胞的细胞形态变化,细胞迁移增殖能力;药物干预48 h后,检测Eca109细胞周期和凋亡的变化,B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、Cytochrome-c、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9变化情况;为进一步探究在体内DRM对食管癌是否有凋亡作用,建立裸鼠荷瘤模型,利用免疫组织化学法检测Caspase-3和Caspase-9表达情况。结果:DRM能抑制Eca109和EC9706细胞增殖,并以浓度依赖方式诱导其发生凋亡(P<0.01),同时抑制细胞迁移(P<0.05)。通过透射电子显微镜观察,经DRM处理后Eca109和EC9706细胞体积缩小、染色质浓缩并出现凋亡小体,而且Eca109细胞经40μmol·L-1 DRM处理后,其凋亡率(34.02±2.03)%显著高于对照组(2.98±1.57)%(P<0.001)。同时Eca109细胞周期被阻滞在G2/M期(P<0.01),Bax表达量上调而Bcl-2表达量下调,凋亡相关蛋白Cytochrome-c、Caspase-3和Caspase-9表达量均显著上调(P<0.05),免疫组化结果显示,多拉菌素在体内同样可以抑制食管癌细胞的增殖作用(P<0.05),并促进凋亡蛋白表达,但在转录组测序结果中,与对照组相比,凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9,表达无显著性差异。结论:DRM在体内和体外均能诱导食管癌细胞发生凋亡,其机制可能与线粒体信号通路转录后调控或翻译后调控相关,DRM可能成为治疗食管癌的有效药物。

• 单位
  东北农业大学; 生命科学学院