1,25-二羟基维生素D3对急性重症胰腺炎模型大鼠淋巴细胞凋亡及Toll样受体4和9表达的影响

作者：吴海涛; 石海霞; 宋玉; 周洪礼

来源：药物分析杂志, 2021, 41(12): 2063-2069.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2021.12.03

• 重症胰腺炎
• 维生素D3
• 淋巴细胞
• 细胞凋亡
• 炎症反应
• 荧光定量
• 酶联免疫吸附法
• 蛋白质印迹法

目的:探究1,25-二羟基维生素D3对急性重症胰腺炎模型大鼠淋巴细胞凋亡及Toll样受体4和9表达的影响。方法:选取90只大鼠,随机分为:正常对照组(A)、模型对照组(B)、低剂量组(C)、中剂量组(D)、高低剂量组(E)和阳性药对照组(F),每组15只。除A组外,其余各组使用牛磺胆酸钠制成急性重症胰腺炎大鼠模型;C、D、E组分别腹腔注射2.5、5、10μg·kg-1的1,25-二羟基维生素D3,F组皮下注射40 mg·kg-1的奥曲肽;采用HE染色观察胰腺组织病理损伤,免疫组化检测胰腺组织的Caspase3含量,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测淋巴细胞Caspase 3和Caspase 9 mRNA和蛋白的表达,酶联免疫吸附法结合RT-PCR检测一氧化氮合成酶(iNOS)、白介素(IL-6、IL-4及IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,蛋白质印迹法检测大鼠胰腺组织中Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体9(TLR9)及核因子κB(NF-κB)的磷酸化情况。结果:相比A组,B组大鼠Caspase3阳性细胞数、Caspase 9、Caspase 3 mRNA的相对水平、cleaved Cas9/Cas9和cleaved Cas3/Cas3值、iNOS、IL-6、IL-4、IL-10及TNF-α表达、TLR4蛋白相对表达、TLR9蛋白相对表达及p65磷酸化水平均显著升高(P<0.05);相比B、D、E和F组Caspase3阳性细胞数、Caspase 9、Caspase 3 mRNA的相对水平、cleaved Cas9/Cas9、cleaved Cas3/Cas3值、iNOS、IL-6及TNF-α表达、TLR4蛋白相对表达、TLR9蛋白相对表达及p65磷酸化水平均显著降低,IL-4、IL-10表达显著升高(P<0.05)。结论:1,25-二羟基维生素D3可抑制重症胰腺炎大鼠淋巴细胞凋亡、缓解炎症反应,可能与抑制TLR4、9表达有关。

• 单位
  青海大学附属医院; 青海大学