牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞上培养增殖影响因素的研究

作者：魏玲; 梁洪; 王怀禹; 吕远蓉; 杨国淋^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (17): 66-145.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.11.0124

• 牛病毒性腹泻病毒
• MDBK细胞
• 培养
• 增殖
• 影响因素
• 病毒含量
• 中和抗体
• 免疫原性

为了确定牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)在牛肾细胞(Madin darby bovine kidey cell, MDBK细胞)上的培养增殖影响因素,试验通过优化接毒剂量、吸附时间、收毒时间、血清浓度、培养液pH值等参数,确定BVDV在MDBK细胞上增殖的最佳培养条件,并利用该培养条件增殖培养BVDV及进行免疫原性试验,研究其对犊牛的免疫原性。结果表明:BVDV在MDBK细胞上培养的最佳接毒量为毒种稀释1×103倍,最佳吸附时间为1 h,最佳收毒时间为接毒后48小时,最佳血清浓度为2%,最佳培养液pH值为7.2,应用最佳培养条件培养的3批次培养物的病毒含量分别为1.0×106.88TCID50/0.1 mL、1.0×106.83TCID50/0.1 mL、1.0×106.88TCID50/0.1 mL,利用该培养物制备的油乳剂灭活疫苗在免疫犊牛后第7天即可产生BVDV中和抗体,至免疫后第180天中和抗体效价仍维持在较高水平,具有良好的免疫原性。说明通过优化培养条件确定了BVDV在MDBK细胞上的增殖培养影响因素,利用该培养条件增殖培养的BVDV的病毒液具有良好的免疫原性。

• 单位
  南充职业技术学院; 川北医学院