人survivin蛋白的原核表达、纯化及抗原活性鉴定

作者：殷小涛; 王伟; 田仁礼; 徐元基; 阎瑾琦; 张巍; 高江平; 于继云

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2013, (08): 877-881.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008231

• Survivin
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 活性检测 survivin
• prokaryotic expression
• protein purification
• antigenicity identification

目的构建人肿瘤抗原survivin的原核表达载体,优化在大肠杆菌中的表达条件,并对survivin/His融合蛋白进行纯化和抗原活性鉴定。方法设计针对survivin基因序列的特异引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增人survivin全长基因序列(538 bp)克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a-survivin,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达survivin/His融合蛋白,并采用Ni亲和层析凝胶纯化重组蛋白。纯化后的重组蛋白经Western blot法、ELISA鉴定其抗原活性。结果重组表达载体经BamHⅠ和HindⅢ鉴定正确...

• 单位
  中国人民解放军总医院; 军事医学科学院基础医学研究所