摘要
建立了急性淋巴细胞白血病患儿血液中红细胞中的硫嘌呤甲基转移酶活性(TPMT)的HPLC测定法。采用反相高效液相色谱法直接测定酶促反应的产物浓度,从而计算红细胞中TPMT的活性。以S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为甲基供给体,6-硫鸟嘌呤(6-TG)作为酶反应底物,TPMT催化6-TG生成2-氨基-6-甲基巯基嘌呤(6-MTG),采用HClO4溶液终止反应及沉淀蛋白,分离上清液进行色谱分析。色谱柱为AichromBond-1 C18柱(5μm,4.6mm i.d.×150mm);等梯度洗脱,流动相为V(乙腈)∶V(0.01mol/L磷酸钾缓冲溶液)=6∶94(用HCl调pH2.74),荧光检测...
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单位中国广州分析测试中心; 广州医学院/第一附属医院; 中国科学院广州地球化学研究所; 广州医学院第一附属医院; 有机地球化学国家重点实验室