摘要
目的:探究视神经萎缩症蛋白1(OPA1)在胃癌(GC)组织中的表达及其对GC细胞增殖及凋亡的影响。方法:应用TCGA和GTEx数据库分析GC组织及癌旁组织中OPA1基因的表达差异。利用qRT-PCR和免疫组织化学检测101例GC组织及癌旁组织中OPA1 mRNA和蛋白表达情况。采用qRT-PCR和Western blot检测人正常胃黏膜上皮细胞GES-1及5株人GC细胞系(AGS、MGC-803、MKN-45、SGC-7901、HGC-27)中OPA1 mRNA和蛋白表达水平。选择OPA1表达量最高的2株GC细胞AGS、SGC-7901为研究对象,将OPA1小干扰RNA(siRNA)慢病毒质粒及其阴性对照分别感染GC细胞,采用荧光显微镜观察感染效率;qRT-PCR检测细胞中OPA1 mRNA表达水平;CCK-8法检测细胞增殖活性;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blot法检测细胞中OPA1、Cleaved-caspase-3、Bax和Bcl-2等蛋白表达水平。结果:OPA1基因在GC组织及细胞株中高表达,siRNA靶向沉默OPA1基因表达可显著下调AGS和SGC-7901细胞中OPA1 mRNA和蛋白表达水平,降低细胞增殖活性和克隆形成能力,并诱导细胞凋亡,上调Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平。结论:OPA1基因在GC组织和细胞中高表达,干扰其表达可抑制GC细胞增殖并诱导细胞凋亡。