机械牵拉刺激对真皮成纤维细胞胶原合成影响的初步研究

作者：李晓荟; 雷铁池; 罗龙飞; 史赢; 徐世正

来源：临床皮肤科杂志, 2016, 45(07): 492-495.

DOI：10.16761/j.cnki.1000-4963.2016.07.004

• 成纤维细胞
• 机械牵拉
• 胶原合成
• 老化

目的:探讨机械牵拉刺激对真皮成纤维细胞胶原合成的直接影响。方法 :自人包皮组织建立原代真皮成纤维细胞培养;将培养的成纤维细胞接种至Falcon细胞培养小室(美国BD公司,货号353092),培养小室底部聚乙烯对苯二甲酸酯(polyethylene terephthalate,PET)膜含有直径3μm的小孔,待成纤维细胞生长至融合,通过重力加压致使PET膜变形,借以机械牵拉PET膜表面附着生长的成纤维细胞。用倒置显微镜观察机械牵拉后成纤维细胞形态学改变;用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白印迹技术检测机械牵拉对成纤维细胞的Ⅰ型胶原蛋白(COL1A),基质金属蛋白酶-1(MMP1),组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1),α2整合素(ITGA2)和α平滑肌肌动蛋白(ACTA2)5种基因m RNA及其蛋白表达的影响。结果:机械牵拉组细胞被拉长呈细长梭形,细胞长轴沿应力方向排列,而未牵拉对照组细胞呈梭形,排列无序散乱;qPCR结果显示机械牵拉组细胞COL1A,TIMP1,ITGA2和ACTA2基因mRNA表达增加,分别为未牵拉对照组的1.43、1.83、1.62、2.18倍(P<0.05),而MMP1基因表达无明显变化(P>0.05);蛋白印迹结果显示5种蛋白表达改变与其基因m RNA表达一致。结论 :机械牵拉刺激能改变真皮胶原蛋白合成-降解平衡,增加Ⅰ型胶原蛋白的从头合成。

• 单位
  武汉大学人民医院