摘要

目的:基于网络药理学和体外实验探索黄连-大黄-肉桂复方(RRC)治疗肝癌的作用机制。方法:通过TCMSP数据库检索RRC的主要活性成分及其对应靶点蛋白,通过Genecards数据库检索肝癌相关基因,采用Venny交集RRC靶点和肝癌相关基因;运用Cytoscape构建复方中药-成分-肝癌靶点网络图;运用DAVID和微生信等在线软件对RRC与肝癌的交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析。采用CCK-8法、流式细胞术和RT-qPCR法分析RRC干预后人肝癌细胞增殖、凋亡及相关凋亡基因mRNA表达的变化,验证上述网络药理学分析结果。结果:筛选到RRC活性成分34个,其中25个含作用靶点,其靶点-肝癌交集基因共190个;复方中药-成分-肝癌靶点网络图显示每个成分均对应多个靶点,每个靶点均受多个成分调控;GO和KEGG分析均显示细胞凋亡等通路显著富集。体外实验证实,各浓度梯度RRC均能不同程度地抑制肝癌细胞增殖,且具有一定的量效和时效关系,1.5 mg/ml RRC能显著抑制肝癌细胞凋亡,上调外源性凋亡途径中相关基因的mRNA表达。结论:RRC治疗肝癌具有多靶点和多通路的作用特点,通过激活外源性凋亡途径,诱导肝癌细胞凋亡,可能是其抗肝癌作用的主要作用机制之一。