维立西呱通过环磷酸鸟苷-磷酸化Smad2通路调节慢性心力衰竭C57BL/6小鼠心肌纤维化

作者：郑巧文; 王孙蓥; 郑彩云; 陈平^*

来源：中华高血压杂志, 2023, 31(12): 1238-1246.

DOI：10.16439/j.issn.1673-7245.2023.12.016

• 心力衰竭
• 维立西呱
• 环磷酸鸟苷
• 转化生长因子β1
• 磷酸化Smad2
• 心肌成纤维细胞
• 心肌纤维化
• 小鼠

目的 探讨维立西呱是否通过环磷酸鸟苷(cGMP)-磷酸化Smad2(p-Smad2)通路抑制慢性心力衰竭(心衰)小鼠的心肌纤维化、改善心脏结构与功能。方法 动物实验：40只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、心衰组、心衰+3 mg/(kg·d)维立西呱组(心衰-Ver3组)、心衰+10 mg/(kg·d)维立西呱组(心衰-Ver10组),每组10只。腹腔注射阿霉素(5 mg/kg, 2次/周，连续6周)构建心衰模型。维立西呱采用灌胃法给药，1次/d,连续8周。心脏超声评价小鼠的心脏结构和功能；天狼猩红染色观察心肌胶原沉积；放射免疫法测cGMP水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)法测转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平；Western-blot法测心肌组织p-Smad2/总Smad2(T-Smad2)水平。细胞实验：组织贴块法培养小鼠心肌成纤维细胞(FBs);以TGF-β1诱导FBsⅠ型胶原、Ⅲ型胶原合成；Western-blot法测FBs p-Smad2/T-Smad2水平；ELISA法测FBs上清液Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平。结果 动物实验：与空白对照组相比，心衰组舒张末期左心室后壁厚度(LVPWD)、舒张末期室间隔厚度(IVSD)增加，左室射血分数(LVEF)降低(均P<0.05),血浆及左心室心肌组织cGMP水平均降低[血浆cGMP:(4.12±0.86)比(6.24±1.35)nmol/L,P<0.05;左心室心肌组织cGMP:(62.01±9.13)比(145.68±24.29)pmol/mg,P<0.05],心肌组织TGF-β1含量、p-Smad2水平、心肌胶原容积分数(CVF)增加(均P<0.05);与心衰组相比，心衰-Ver3组、心衰-Ver10组LVPWD、IVSD降低，LVEF增加(均P<0.05),血浆及左心室心肌组织cGMP水平增加[血浆cGMP:(6.68±1.13),(15.49±2.07)比(4.12±0.86)nmol/L,P<0.05;左心室心肌组织cGMP:(139.25±21.54),(162.74±30.92)比(62.01±9.13)pmol/mg,P<0.05],心肌组织p-Smad2蛋白水平、CVF降低(均P<0.05),但血浆和心肌组织TGF-β1水平差异无统计学意义(P>0.05)。细胞实验：TGF-β1(1～30 ng/mL)可促进FBsⅠ型胶原、Ⅲ型胶原合成；维立西呱(10-6～10-4 mol/L)能抑制TGF-β1(10 ng/mL)诱导的FBsⅠ型胶原、Ⅲ型胶原合成；维立西呱(10-5 mol/L)及Smad2抑制剂(10-4 mol/L)均可降低TGF-β1(10 ng/mL)处理的FBs的p-Smad2、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原水平(P<0.01);cGMP抑制剂(10-4 mol/L)可削弱维立西呱(10-5 mol/L)对TGF-β1(10 ng/mL)诱导的FBs p-Smad2、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的抑制作用(P<0.05)。结论 维立西呱通过增加cGMP、抑制心肌组织p-Smad2水平，减轻慢性心衰小鼠的心肌纤维化，改善心脏结构与功能。

• 单位
  福清市医院; 福建医科大学