肺炎链球菌Spr0982的表达纯化及保守性分析

作者：余维丽; 鹿中华; 杨翔; 郑瑶; 孙昀

来源：生物加工过程, 2017, 15(04): 64-69.

• 肺炎链球菌
• Spr0982蛋白
• 重组表达
• 保守性
• 耐药性

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的糖基转移酶是与其耐药性或致病性相关的基因。本文以S.pneumoniae R6菌株基因组为模板,利用PCR克隆S.pneumoniae中的糖基转移酶(spr0982)基因,构建重组p28(PET28b改造的克隆载体)-Spr0982载体,转化至大肠杆菌BL21-Ril中,利用IPTG诱导表达,并对目的蛋白进行纯化条件的研究。采用Clustal W在线工具对Spr0982蛋白在不同肺炎链球菌菌株中的保守性进行分析。结果显示:p28-Spr0982重组质粒构建成功,经IPTG诱导后于BL21-Ril菌株中获得大量以包涵体形式存在的目的蛋白质;通过QFF阳离子交换柱和分子筛层析获得较纯的可溶目的蛋白;Spr0982蛋白在不同肺炎链球菌中的保守程度高达99.3%。本研究对于理解S.pneumoniae的致病性和耐药机理研究具有指导意义。

• 单位
  安徽医科大学第二附属医院