胶质瘤干细胞外泌体微小RNA-574-5p的表达及在肿瘤侵袭中的作用

作者：鲍子戌; 胡珊珊; 牛朝诗^*

来源：立体定向和功能性神经外科杂志, 2021, 34(04): 204-210.

DOI：10.19854/j.cnki.1008-2425.2021.04.0003

• 外泌体
• 神经胶质瘤
• 胶质瘤干细胞
• 微小RNA
• miR-574-5p
• 肿瘤侵袭

目的探讨胶质瘤干细胞(glioma stem-like cells,GSCs)来源的外泌体(exosome)中微小RNA-574-5p(miR-574-5p)的表达水平及其对胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法利用神经细胞球培养法分离恶性胶质瘤细胞系U87来源的胶质瘤干细胞(GSCs),并用免疫荧光染色鉴定其表面标志物。收集胶质瘤干细胞上清液并提取其中的外泌体(GSCs-Exosome),利用深度测序技术分析其中不同微小RNA的表达水平。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证测序结果。利用靶向miR-574-5p的特异性模拟物及抑制剂转染胶质瘤细胞调控miR-574-5p的表达水平。应用细胞划痕、Transwell实验分别检测GSCs-Exosome及不同miR-574-5p含量对胶质瘤细胞侵袭及迁移能力的影响。结果肿瘤球于神经干细胞培养基中呈悬浮生长,免疫荧光染色证实其特异性表达肿瘤干细胞标志物CD133及神经细胞标志物Nestin。胶质瘤干细胞来源的外泌体中miR-574-5p的含量明显高于人脑正常胶质细胞来源的外泌体,RT-qPCR验证测序结果可靠(均P<0.001)。与对照组相比,GSCs-Exosomes处理的胶质瘤细胞侵袭及迁移能力明显增强(均P<0.05)。此外,过表达miR-574-5p同样明显促进肿瘤细胞侵袭及迁移能力,而抑制miR-574-5p则抑制其侵袭能力(均P<0.05)。结论微小RNA-574-5p在胶质瘤干细胞来源的外泌体中高表达,胶质瘤干细胞外泌体及miR-574-5p均明显促进胶质瘤细胞侵袭及迁移能力。因此,外泌体中微小RNA-574-5p可能作为胶质瘤治疗的新靶点。

• 单位
  安徽省立医院; 安徽医科大学; 中国科学技术大学; 安徽省脑立体定向神经外科研究所