烟草烟雾通过ROS/Sirt3/SOD2通路诱导NSCLC细胞吉非替尼耐药

作者：訾亚婉; 廖科; 陈虹^*

来源：中国肺癌杂志, 2023, 26(04): 245-256.

DOI：10.3779/j.issn.1009-3419.2023.106.05

• 肺肿瘤
• 烟草烟雾
• ROS
• Sirt3/SOD2
• 吉非替尼耐药

背景与目的 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)最常见的驱动基因突变。为延长患者生存时间，NSCLC EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors, TKIs)耐药是目前急需解决的重大难题。本研究主要探究烟草烟雾(cigaree smoke, CS)诱导NSCLC发生吉非替尼耐药的机制。方法 体外培养PC-9、A549细胞，分别经1μmol/L吉非替尼处理4 h、10%CS萃取物(CS extract, CSE)处理48 h。Western blot检测沉默蛋白3(Sirtuin 3, Sirt3)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2, SOD2)蛋白表达，使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平，CCK-8试剂盒检测细胞活性，Ed U检测细胞增殖能力。Sirt3过表达质粒(OV-Sirt3)转染于PC-9和A549细胞中、N-乙酰半胱氨酸乙酯(N-acetylcysteine, NAC)作用于细胞后分别经1μmol/L吉非替尼处理4 h和10%CSE处理48 h。Western blot检测Sirt3、SOD2蛋白表达，DCFH-DA探针检测细胞中的ROS水平，CCK-8检测细胞活性。结果 CSE均可促使PC-9、A549细胞对吉非替尼的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration, IC50)提高(P<0.01)，并且增强PC-9和A549细胞的增殖能力，提示CS可诱导NSCLC吉非替尼耐药；ROS参与CSE诱导的吉非替尼耐药(P<0.05);CSE诱导Sirt3、SOD2低表达(P<0.01)，且Sirt3/SOD2与肺癌患者不良预后有关(P<0.05);OV-Sirt3的PC-9、A549细胞可逆转CSE诱导的吉非替尼耐药(P<0.05)且显著降低ROS生成；NAC可逆转CSE诱导的PC-9、A549细胞吉非替尼耐药(P<0.05)。结论 ROS/Sirt3/SOD2通路参与了CS诱导的NSCLC吉非替尼耐药。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院