转染Smad2基因的大鼠肾系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原表达的改变

作者：王小刚; 于鸿; 陈琦; 赵仲华; 张志刚; 郭慕依

来源：中华病理学杂志, 2005, (02): 97-100.

DOI：10.3760/j.issn:0529-5807.2005.02.009

• 肾小球硬化症,病灶性
• 转染
• 信号传递
• 纤连蛋白类
• 胶原

目的　通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF -β) /Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制。方法　经磷酸钙介导将含有Smad2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析法鉴定,又分别采用Western印迹分析法和逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测转染阳性细胞克隆FN及ColⅣ表达的改变。结果　成功建立高表达Smad2蛋白的阳性MsC克隆(T -12、T -31、T -35、T -40),并证实其FN及ColⅣ的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调。阳性MsC克隆FN蛋白为对照组2. 4倍(P<0. 05),mRNA为对照组的2. 7倍(P<0 .05);阳性MsC克隆ColⅣ蛋白为对照组2 9倍(P<0。01 );mRNA为对照组的3. 3倍(P<0 .01 )。结论　TGF- β/Smad信号转导途径中的Smad2可能是促进FN及ColⅣ在肾小球中积聚,是导致肾小球硬化发生的重要信号转导分子。

• 单位
  复旦大学