不同时长氧糖剥夺对大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系的影响

作者：程伟能; 张玉琴; 赖文芳; 陈亚萍; 南丽红^*; 黄枚^*

来源：中药药理与临床, 2021, 37(04): 195-200.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.2021.04.024

• 氧糖剥夺
• 神经元
• 小胶质细胞
• 凋亡
• 乳酸脱氢酶
• 离子钙结合衔接分子1
• 肿瘤坏死因子-α

目的:探讨不同时长氧糖剥夺(OGD)对大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系的影响。方法:提取新生SD大鼠原代皮层神经元及小胶质细胞,经免疫荧光法鉴定细胞纯度达到95%以上,可用于建立大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系并进行OGD处理;分别设置空白对照组、氧糖剥夺0.5 h、1 h、2 h、4 h组,除空白对照组不进行OGD处理,其余各组分别OGD处理0.5、1、2、4 h;复糖复氧24 h后,比色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测离子钙结合衔接分子1(Iba1)阳性细胞数,ELISA法检测上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:与空白对照组相比,氧糖剥夺4 h组细胞凋亡率、Iba1阳性细胞率无显著性差异;氧糖剥夺0.5 h组、1 h组和2 h组中的LDH含量、细胞凋亡率、Iba1阳性细胞数及TNF-α含量均明显增多(P<0.05或P<0.01)。与氧糖剥夺2 h组相比,氧糖剥夺0.5 h组中的LDH含量及TNF-α含量明显降低;氧糖剥夺1 h组中TNF-α含量明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系经OGD处理2 h可较好模拟缺血性脑损伤后两细胞的相互作用。

• 单位
  福建中医药大学