摘要
目的:制备并纯化抗变异链球菌卵黄抗体(抗S.mutans-IgY),观察其对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)胞外多糖、葡糖基转移酶活性、生物膜形成及活性的影响。方法:将甲醛灭活的S.mutans免疫150日龄白航蛋鸡4次,每次间隔10 d,取鸡蛋用两步硫酸铵沉淀法提取IgY,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫后效价变化。蒽酮法测定水不溶性及水溶性胞外多糖;Neson-Somogyi法测定葡萄糖基转移酶活性;二甲氧唑黄[2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrzo lium hydroxide,XTT]还原比色法研究IgY对生物膜总量的影响;采用激光共聚焦显微镜观察牙菌斑生物膜中死菌和活菌的构成。结果:经4次免疫后抗体最高效价为1∶256000,维持40 d;IgY对S.mutans合成水不溶性胞外多糖的能力较对照组有明显抑制(P<0.01);药物作用后S.mutans还原糖、酶活力均降低(P<0.01);XTT法结果显示IgY对S.mutans生物膜抑制率为17.02%~74.13%;激光共聚焦显微镜观察到随着药液浓度增加,绿色的活菌、团块结构减少,生物膜厚度明显减小。结论:一定浓度IgY能够抑制S.mutans的增殖,具有抗龋作用。
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单位安徽医科大学; 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司; 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司; 安徽医科大学附属口腔医院