中蜂囊状幼虫病毒RdRp基因dsRNA干扰的研究

作者：史红霞; 党晓群^*; 朱祥龙; 马振刚; 刘永梅; 黄钰彬; 周泽扬; 许金山

来源：病毒学报, 2019, 35(01): 103-111.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003482

• 中华蜜蜂
• 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)
• RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)
• dsRNA的体外表达
• RNAi

中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)可以引起中蜂幼虫死亡,给中蜂的养殖造成严重的威胁。其RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)是病毒复制中必不可少的中心酶,控制着病毒的复制和翻译过程。本研究以CSBV RdRp基因为靶标,选取两个干扰区域RdRp-1和RdRp-2,并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后进行RNAi实验,通过qRT-PCR检测CSBV RdRp基因的表达情况。实验结果显示:干扰片段RdRp-1不能显著下调RdRp基因的转录,而干扰片段RdRp-2可显著性下调RdRp表达并具有剂量依赖性,当添食2μg dsRdRp-2时,在72 h RdRp基因表达下调了85%,CSBV的衣壳蛋白VP1基因下调表达78%,幼虫死亡率降低60%,表明RdRp基因可以作为RNA干扰的靶标用于CSBV防治,本研究为后期在养蜂场进行蜜蜂病毒病的防治奠定了基础。

• 单位
  重庆市动物生物学重点实验室; 重庆师范大学