摘要

目的探究泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养后,原头节的活性、成囊以及肝癌细胞的增殖与凋亡情况。方法构建泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养模型,以存在肝癌细胞共培养的泡球蚴原头节为实验组,无肝癌细胞共培养的泡球蚴原头节为对照组,光镜下观察泡状棘球蚴原头节存活数量、活性以及成囊情况;以存在原头节共培养的肝癌细胞为实验组,无原头节共培养的肝癌细胞为对照组,利用CCK-8检测肝癌细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测肝癌细胞凋亡情况,Real-Time PCR检测凋亡相关分子caspase3、caspase9、Bax、Bcl-2、P21、P53的mRNA表达情况,Western-blot方法检测caspase3、caspase9、Bax、Bcl-2的蛋白表达情况。结果共培养后,实验组泡球蚴原头节的存活率[(91.42±2.47)%]显著高于无饲养细胞组[(73.10±4.68)%,t=-7.738,P<0.05],且活性较高;利用肝癌细胞作为饲养细胞时原头节的成囊率[(66.72±2.02)%]显著高于无饲养细胞组的成囊率[(30.21±2.25)%,t=11.228,P<0.01];CCK-8结果显示随着原头节的比例增高,肝癌细胞的增殖能力逐渐增强,且显著高于对照组;Real-Time PCR显示实验组的Bcl-2表达量显著高于对照组,而caspase3、caspase9、Bax、P21、P53的表达量低于对照组。Western blot结果与实时荧光定量PCR结果相一致,显示实验组Bcl-2表达量显著高于对照组,而caspase3、caspase9、Bax的表达量低于对照组。结论泡球蚴原头节与肝癌细胞共培养时肝癌细胞可以促进原头节的存活,且会使原头节保持高活性状态,促进其成囊;反之原头节也会促进肝癌细胞的增殖,抑制肝癌细胞的凋亡。