转基因在菊花叶肉原生质体瞬时表达及亚细胞定位分析

作者：丁林云; 万可; 杨丹; 王同; 王春梅; 郭书巧; 杨霞^*

来源：江苏农业学报, 2023, 39(02): 518-524.

• 菊花
• 原生质体
• 瞬时表达
• 亚细胞定位

为探究用于亚细胞定位研究的菊花叶肉原生质体分离的最适条件，本研究以菊花无菌苗叶片为受体材料，分析不同叶龄叶片和酶解时间对菊花原生质体细胞产量的影响，并利用外源质粒的导入验证了聚乙二醇(PEG)介导的菊花原生质体瞬时转化体系。结果表明，以组织培养14 d的菊花无菌苗叶片为外植体材料，在含1.5%纤维素酶、0.4%离析酶和0.8 mol/L甘露醇的酶解液中振荡酶解6 h,能获得高产的原生质体细胞。采用PEG介导的瞬时转化含绿色荧光蛋白(GFP)的表达载体，在菊花原生质体细胞中观察到强烈的绿色荧光信号。结果显示，稗草乙烯转录因子基因(EcERF)在菊花原生质体中与本氏烟草叶片中的瞬时表达一致，EcERF基因定位于细胞核中。

• 单位
  江苏省农业科学院; 南京农业大学; 中心实验室