摘要
目的探讨柴胡皂苷b2(SS-b2)对过氧化氢(H2O2)诱导的L-02细胞损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将L-02细胞分为正常对照组、模型组(H2O2100μmol·L-1孵育12 h)和SS-b2组(SS-b212.5,25,50和100 mg·L-1孵育24 h后,再加入H2O2继续孵育12 h)。MTT法检测L-02细胞存活率;罗丹明123染色检测L-02细胞线粒体膜电位变化;Hoechst33258荧光染色法和流式细胞术检测L-02细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测线粒体凋亡通路蛋白Bcl-2、Bax、细胞色素c(Cyt-c)、胱天蛋白酶9和3表达水平。结果与正常对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01);细胞线粒体膜电位水平降低(P<0.01)且细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Bax(P<0.01)、Cyt-c(P<0.01)、胱天蛋白酶9(P<0.05)和3(P<0.05)蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.01)。与模型组相比,SS-b2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性(r=0.9804,P<0.05);线粒体膜电位水平升高(P<0.01);Hoechst染色和流式细胞检测结果均显示,细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01);Bax、Cyt-c、胱天蛋白酶9和3蛋白水平显著下调(P<0.01),且Bcl-2蛋白水平上调(P<0.01)。结论 SS-b2可减轻H2O2诱导的L-02细胞损伤,其机制与抑制线粒体凋亡有关。
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