摘要
目的探究氯化锂调控端粒酶逆转录酶(TERT)抑制老年痴呆模型大鼠脑细胞的凋亡作用。方法选择45只大鼠,随机分为假手术组、模型组、锂治疗组,每组15只。模型组和锂治疗组通过注射β-淀粉样蛋白(Aβ)构建老年痴呆大鼠模型;建模后假手术组、模型组腹腔注射0.5 ml的生理盐水,锂治疗组腹腔注射0.5 ml剂量为1 mg/kg的氯化锂生理盐水溶液,1次/d,治疗3周。通过水迷宫实验,检测大鼠的学习能力和认知能力。实验结束后迅速将大鼠处死,制备脑组织匀浆,通过酶联免疫吸附法(ELISA)分析TERT活性;通过原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析各组大鼠脑组织细胞凋亡情况;通过蛋白印记(western blot)分析各组大鼠脑组织中的蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示锂治疗组大鼠的逃避潜伏期显著低于模型组,目标象限的穿台次数和时间明显高于模型组(P <0.05)。ELISA检测显示,与模型组相比,锂治疗组大鼠的TERT活性明显增加,差异有统计学意义(P <0.001)。TUNEL染色分析发现,与模型组相比,锂治疗组大鼠脑组织中凋亡细胞比例明显降低,差异有统计学意义(P <0.05)。Western blot蛋白分析结果显示,与模型组相比,锂治疗组大鼠脑组织中三肽氨基肽酶-1(TPP1)、端粒保护蛋白-1 (POT1)、抑癌基因p53及抑凋亡B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)蛋白的表达量明显增加,TERT、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)和裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 (cleaved-caspase-3)蛋白的表达明显受到抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化锂能够通过调控端粒酶逆转录酶抑制老年痴呆模型大鼠脑细胞的凋亡作用。
-
单位华北理工大学; 吉林大学第二医院