心肌分化过程中经典Wnt信号促进Isl1表达

作者：李彦明; 鲁华菲; 李涛; 陈苹; 马康涛; 周春燕; 贾竹青

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2015, 31(08): 827-835.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2015.08.08

• 心肌分化
• P19CL6细胞
• 胰岛因子1
• 表达调控
• 经典Wnt信号通路

ISL1是第二生心区的分子标志,在心血管发育中发挥重要作用.在心脏发育过程中,Isl1的表达具有鲜明的时空特异性.本研究利用P19CL6畸胎瘤干细胞作为心肌分化模型,探讨了Isl1在心肌诱导分化过程中的时间特异性表达及经典Wnt信号通路对其的调控.研究发现,Isl1在心肌分化早期高表达,于诱导第4 d到达高峰,随后快速下调.其表达趋势与经典Wnt通路的激活模式具有时间上的同步性.通过加入Wnt3a蛋白及Li Cl激活经典Wnt通路,能够促进Isl1基因的表达,而Wnt通路抑制分子Frizzled-4/Fc和DKK1能够下调Isl1表达.β-catenin过表达及RNAi实验也获得相似的结果.染色质免疫共沉淀实验证实,Wnt通路效应分子LEF1,在细胞分化第4 d与其在Isl1基因启动子上游-2 300 bp处的结合增强,因而促进了Isl1基因的表达.本研究表明,经典Wnt信号能够通过LEF1/β-catenin与Isl1启动子特异结合,调控Isl1基因在心肌早期分化阶段的表达.

• 单位
  基础医学院; 北京大学; 生命科学学院; 浙江师范大学; 河南大学淮河医院